载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/25 20:28:03
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载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻
载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?
将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻轻混匀 冰上放置30分钟 42度水浴90秒 冰浴2分钟 加入200ulLB液体培养基 37度摇床30分钟 然后涂板 4度冰箱 在往后是质粒DNA的转化 就是把连接产物换成了PUc19质粒了,其他步骤都一样 请问这是为什么呢?
那感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落,用哪个呀? 我的意思是筛选出重组子克隆是要从感受态细胞加入连接产物培养出的菌落选呢?还是感受态加入质粒培养出来的菌落里选呢?要是两个里面都有选哪个比较好,选出来了之后要质粒小量提取了吗?要从上面两个菌里哪个里提取呢??重点就是感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落哪个是质粒小提要提取的呢??求助高人们了指点一下我这个菜鸟吧
载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻
PUC19是个正control,就是一定会出clone的,如果没有,就是操作步骤有问题
看你的protocol就是重复做一遍
这样的话还不如一起做
涂板以后直接放37度啊
补充:根据你的说法,从“连接产物”里面选,PUC19是正control了,你挑克隆只会挑到跟原来一样的,没有用的
ps:“连接产物”那也是个质粒