PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/20 05:47:28
![PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.](/uploads/image/z/13105137-57-7.jpg?t=PCR%E4%BA%A7%E7%89%A9%E5%87%9D%E8%83%B6%E7%94%B5%E6%B3%B3%E4%B8%8D%E7%90%86%E6%83%B3%E6%98%AF%E6%80%8E%E4%B9%88%E5%9B%9E%E4%BA%8B%3F%E5%B8%88%E5%A7%90%E5%9C%A8%E4%BA%8C%E6%9C%88%E5%81%9A%E4%BA%86%E4%B8%80%E6%AC%A1%2C%E6%88%91%E5%9C%A8%E4%BA%94%E6%9C%88%E9%87%8D%E5%A4%8D%E4%BA%86%E5%BE%88%E5%A4%9A%E6%AC%A1%E9%83%BD%E4%B8%8D%E7%90%86%E6%83%B3%2C%E8%AE%B8%E5%A4%9A%E6%9D%A1%E5%B8%A6%E8%B7%91%E4%B8%8D%E5%87%BA%E6%9D%A5.%E9%97%AE%E4%B8%80%E4%B8%8B%E6%98%AF%E4%B8%8D%E6%98%AF%E5%A4%9A%E6%AC%A1%E5%86%BB%E8%9E%8D%E6%A8%A1%E6%9D%BFDNA%E9%99%8D%E8%A7%A3%E4%BA%86.)
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?
师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
建议与marker一起跑电泳,如果marker跑出的带是完整的,而模板DNA有拖尾、弥散等,就基本可以确定模板DNA降解了;如果marker跑出的带也是弥散的,那可能是琼脂糖质量不好,或者是电泳Buffer不好,建议换琼脂糖、重配Buffer.
电压怎样,太大会溶胶,太小会跑太慢。或者跑过了。
含有溴酚蓝的loading buffer的配比有问题,其中的甘油量,可能过少,致使密度不大,没有使样品沉降到点样孔中。
Buffer加有SDS的量不对,没有除尽的聚合酶,影响DNA双链的迁移速率。
我做的时候也有没分开,是因为电压的问题(机器太老了,又没有守在旁边,断电了)。...
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电压怎样,太大会溶胶,太小会跑太慢。或者跑过了。
含有溴酚蓝的loading buffer的配比有问题,其中的甘油量,可能过少,致使密度不大,没有使样品沉降到点样孔中。
Buffer加有SDS的量不对,没有除尽的聚合酶,影响DNA双链的迁移速率。
我做的时候也有没分开,是因为电压的问题(机器太老了,又没有守在旁边,断电了)。
收起
1.样品有降解
2.EB染色不够
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
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DNA扩增产物经琼脂糖凝胶电泳条带不清晰的原因
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