持家基因和目的基因退火温度相差很大,怎么跑定量PCR啊?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/22 14:12:25
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2个方案,第一个,重新设计一个引物,可以加长引物长度来增加退火温度.
第二个,分成两锅跑PCR,轻松就搞定.
新手?这个问题本身就不是问题,好多定量引物都是公司设计的,长度啥的都考虑好了,而且定量引物一般很短,PCR长度很短,特异性非常强,退火温度相差不会太大,即使很大,也很有希望能够找到合适温度一起跑能出的.
持家基因和目的基因退火温度相差很大,怎么跑定量PCR啊?
内参基因与目的基因的Ct值相差很大是什么原因
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做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因?
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我在扩一基因的全长,设计的一对特异引物退火温度一个47度,一个64度,我该怎么确定退火温度?
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求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢?
请问小鼠的DMC1基因是普通的基因吗?不是特殊基因吧.用该基因设计引物,以CDNA为模板,PCR后只有引物二聚没有目的条带,退火温度做了梯度,还是没有条带.是什么原因呢,我的同事用相同的模板,
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