RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 04:14:12
RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是

RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是
RT-PCR扩增条件问题
我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是一样的.但是我在扩增的时候,为了达到最大的扩增效率,这六个基因我都分别采取了不用的扩增温度、循环数,这样各组得出来的CT值具有可比性吗?期待尽得到答复,谢谢……

RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是
应该可以,CT只是和你初始的mRNA表达量有关,当然的是在各种酶和原料充足的的情况下,和循环次数没什么关系 不过有问题的就是你的荧光蛋白发光会受到温度影响的,你只能大概的比较下,表达量大的话还好,如果差异小的,建议重新做一下

RT-PCR扩增条件问题我是做real-timePCR,需要测定六个基因的mRNA表达差异.这六个基因我是分开来扩增的,因为样本太多.每个样本都达到了平台期的,并且我所加的mRNA的模板数、引物量、dye、mix都是 RT-PCR模板选择问题.我是准备设计简并引物扩增一个鱼类的未知基因的保守区.一些文献上是提取脑部总RNA,然后反转录得到第一链CDNA,然后用这CDNA做模板扩增保守区.但是我老师的想法是直接提 RT-PCR时,扩增片段长度多态性 影响RT-PCR扩增产物因素 关于RT-PCR扩增效率的问题初做RT-PCR,仪器会自动给出吗?我们用的Agilent Mx3000P,好像没有给出这个值,我要怎么得知这个值? 做RT-PCR扩增后跑琼脂糖凝胶电泳有什么作用? 请问做RT-PCR时,怎么根据扩增的片段长度确定dNTP的用量? PCR扩增不出就引物有问题吗? PCR扩增不出就引物有问题吗? 关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30 PCR,RT-PCR,GAPDH.real time之间的联系. RT-PCR和Real time-PCR有什么区别 Real-time PCR和RT PCR有什么区别? 疫苗RT-PCR扩增加多少DEPC较好 用mRNA做模板PCR的问题?用双链DNA扩增的原理比较好理解,而用单链的RNA扩增怎么设计引物呢?产物是双链DNA吗 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? 北京哪里能做real time PCR PCR基因扩增问题退火温度根据什么判断?