什么原因会导致overlap PCR拼不出?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 22:41:58
什么原因会导致overlap PCR拼不出?
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什么原因会导致overlap PCR拼不出?
两个片段的大小不能太大.
中间重叠部分不能太短,至少要有20nt以上.30,40比较好.
试试把退火时间延长一些,看能不能把两条链连上。一般就是照着引物的Tm值做就可以的。 你的设计有没有问题?重叠那段的引物是连接的关键,而这段
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来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 22:41:58
什么原因会导致overlap PCR拼不出?
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两个片段的大小不能太大.
中间重叠部分不能太短,至少要有20nt以上.30,40比较好.
试试把退火时间延长一些,看能不能把两条链连上。一般就是照着引物的Tm值做就可以的。 你的设计有没有问题?重叠那段的引物是连接的关键,而这段