TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/18 16:46:35
![TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱](/uploads/image/z/9318555-27-5.jpg?t=TLC%E8%96%84%E5%B1%82%E8%89%B2%E8%B0%B1%E6%B3%95.%E5%B0%86%E4%BE%9B%E8%AF%95%E6%B6%B2%E5%8F%8A%E4%BE%9B%E8%AF%95%E6%B6%B2a%E3%80%81%E5%AF%B9%E7%85%A7%E6%B6%B2b%E5%90%845ul%E5%88%86%E5%88%AB%E7%82%B9%E4%BA%8E%E8%96%84%E5%B1%82%E6%9D%BF%E4%B8%8A%2C%E5%B9%B6%E5%B0%86%E7%82%B9%E5%A5%BD%E7%9A%84%E8%96%84%E5%B1%82%E6%9D%BF%E7%BD%AE%E4%BA%8E%E5%B1%82%E6%9E%90%E5%AE%A4%E4%B8%AD%E6%94%BE%E7%BD%AE15%E5%88%86%E9%92%9F%2C%E5%B1%82%E6%9E%90%E4%B8%AD%E5%BA%94%E7%94%B18%E4%BD%93%E7%A7%AF%E6%B5%93%E6%B0%A8%E3%80%818%E4%BD%93%E7%A7%AF%E7%94%B2%E9%86%87%E5%92%8C84%E4%BD%93%E7%A7%AF%E4%B9%99%E9%85%B8%E4%B9%99%E9%85%AF%E6%89%80%E7%BB%84%E6%88%90%E7%9A%84%E5%B1%95%E5%BC%80%E5%89%82%E7%9A%84%E8%92%B8%E6%B1%BD%E6%89%80%E9%A5%B1)
TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱
TLC薄层色谱法.
将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和,并且立即用同样的混合溶剂展开至约15cm.用冷空气流干燥薄层板,置于碘蒸气中显色直至得到对照液的主斑点,在254nm处用紫外光检测.
以上是原文省去了供试液等的制备及最后结果的判断.
我有以下疑问望各位前辈给予指点:
1、“并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟”,这个15分钟是怎么样放置的?层析室中是要放展开剂吗?如果是的话,那不是已经开始展开了吗,何必下面又来句同样的混合溶剂展开15cm呢?这点到底应该怎么操作呢?我以前做其它样品的时候是点完样之后直接展开15cm的,没有要求放置15分钟.
2、“层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱和”,如果按展开剂8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的话,展开样品的时候,岂不是已经超过点样点了吗?展开剂不是不能够超过点样的位置吗?我是否可以把比例放小?既然能够放小为何又说8:8:84呢,直接说2:2:21呢?
3、我在没有放置15分钟和展开剂按2:2:21得时候,分离效果不是很好,分不开.
TLC薄层色谱法.将供试液及供试液a、对照液b各5ul分别点于薄层板上,并将点好的薄层板置于层析室中放置15分钟,层析中应由8体积浓氨、8体积甲醇和84体积乙酸乙酯所组成的展开剂的蒸汽所饱
1.点样板入展开缸但不接触展开剂,使点样板在缸中饱和后进行展开.这样Rf值相对小,层析效果比较好.
具体操作可以是将层析缸倾斜,放入点样板使其不接触展开剂,加盖并用凡士林防滑密封,15分钟后,轻轻放平层析缸.
2.可以通过调节层析缸倾斜角度来控制; 或配展开液后,取适量移入缸内
3.分不开或拖尾可能是没有进行饱和,你可以提前配好展开剂,比如早晨先配好,然后处理样品;还有甲醇,乙酸乙酯很容易挥发所以展开剂的比例不可以太小;样点不要太大;
还有,不是每个分析所用的展开剂都是最合适的;再说样品杂志可能很多,对比一下对照品.